质粒提取属于什么工作 质粒提取是什么实验
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2024-09-07
您好,今天小编刀哥来为大家解答以上的问题部件提取的原理,现在让我们一起来看看吧!
1、需要掌握技能1.代替转化具体操作步骤:将1ul 端子DNA 液体1.5ml DNA 液体1.5ml 定时器:30分钟、42分钟、90秒、5分钟1小时;吸取200ul培养物至含相应抗生素的90mm LB平板上,翻转棒将培养液均匀;倒置平皿,于37℃培养,12~4
2、2.外接的抽提具体操作步骤:用前将RNase A一般储存于4℃);将60ml的乙醇加到洗涤缓冲液瓶中37℃培养4 p.m.,加入10ml LB培养液37℃振荡振摇培养4 p.m.;取4ml at 5ml at 8000rpm at 3min; 250 ul Solution Ⅰ(注意用前应加RNase A管),于涡旋振荡器重悬细胞;加250ul 37℃预热2-3min的溶液Ⅱ;加350ul溶液Ⅲ,将5ml离心管安置拇指和食指间轻轻地翻转翻转数次;将5ml离心管安置在拇指和食指间轻轻地翻转翻转数次;管中的溶液沉淀1.5ml离心管中,连续离心管2-3min,12000rpm 4℃,15min,2ml管(蓝色)中;8000rpm,3min;厉收集管10000rpm,1min,750ul Wash Buffer (注意用前加乙醇),10000rpm,1min;;不加Wash Buffer,10000rpm,1min;将柱状管置于一个消过毒的1.5ml,加65ul灭菌,速度2min,8000rpm,3min速度DNA. 0.16g琼脂糖,并倒20ml 1min30s,至肉眼看不到颗粒状琼脂状态;至待溶液冷却至60分钟,将三角瓶溶液中溶液制成胶盒中,拔掉梳子放入凝剂胶安转弧槽内;向弧槽加入弧度1mm如下:若样品体积为20ul加入2ul 10X上样缓冲液,若为30ul,加入3ul 10X;掉电源,在Dark Reader荧光仪观察结果。
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