你为什么要为老鼠制作一个流式细胞仪面板？

我们从事免疫学和生物工程的交叉领域，每个领域都有不同的模型体系。一直以来，小鼠都是免疫学的主力军，所以试剂的数量绝对是太多了。然而，研究人员在评估医疗设备和生物材料时更频繁地使用大鼠，但试剂的可用性有限。我们希望在小鼠模型的基础机械免疫学研究和大鼠模型的生物材料研究之间架起一座桥梁。我们的目标是找出老鼠有什么工具，把它们组装成一个可用的工具箱，并展示这个工具箱。光谱流式细胞仪使我们能够使用相似颜色的荧光团，但这些荧光团可能不会在标准流式细胞仪上一起使用。

您是如何构建光谱流式细胞仪面板的？

为了建立我们的团队，我和这篇论文的主要作者肯尼斯·阿杜塞(Kenneth Adusei)搜索了各种大鼠抗体的现有产品。我们创建了一个试剂电子表格，显示哪些供应商有哪些抗体和哪些颜色。至于使用哪种荧光团，我们需要评估样品的自发荧光以避免自发荧光的峰值通道。

光谱流式细胞仪有什么优缺点？

介绍低细胞计数是一种广泛使用的分析技术，它可以根据所选标记物的存在与否来区分细胞群。然而，可以包括在流式细胞仪面板中的标记的数量受到低细胞计数的限制，低细胞计数是一种广泛使用的分析技术，并且可以根据所选标记的存在与否来区分细胞群。然而，可以包含在流式细胞仪面板中的标记物的数量受到具有可区分发射光谱的荧光团数量的限制。光谱流式细胞术是传统流式细胞术的进化版本，它通过区分相似的发射荧光团来克服这个问题，从而增加了面板尺寸。

凯特琳·萨德勒(Kaitlyn Sadtler)是Earl Stadtman的研究人员，也是美国国家生物医学成像和生物工程研究所(NIBIB)免疫工程部门的主任，他研究组织创伤和医疗设备植入的免疫反应。在最近发表的论文《细胞、组织和器官》中，Satler的实验室开发了24色光谱流式细胞仪面板，用于研究大鼠肌肉损伤部位的免疫细胞浸润。一个

什么是流式细胞仪和光谱流式细胞仪？

当细胞流过机器时，流式细胞术一次测量一个细胞上不同蛋白质的表达。你可以把它想象成一个穿过花园水管的弹珠。当每个弹珠经过时，探测器会说& ldquo这个大理石里有橙色& rdquo或者& ldquo这块大理石是紫色的。。这些不同的颜色代表荧光团的峰值发射，这告诉我们细胞上存在什么蛋白质。

生活和科学中的一切都是混乱的。一些荧光团发出多种波长，因此一些大理石内部有红橙色，而不仅仅是橙色或红色。光谱流式细胞仪是流式细胞仪的一种，它不看特定通道(橙色通道或红色通道)中的峰值，而是看整个光谱的模式。这项技术使研究人员能够区分颜色非常相似的荧光团的信号。

光谱流式细胞术使科学家能够区分荧光团的真实信号和重叠荧光团可能发出的信号。这使得研究人员可以自信地一次测量更多的颜色。他们得到了更多他们想要的信息，但他们也得到自发荧光的噪音。我们使用具有高自发荧光的样品，其中一些来自骨髓细胞本身。在我们给它们染色之前，它们会发出明亮美丽的颜色。这给了我们一个额外的变量来处理。但是自发荧光也提供了很多信息。例如，我们可以仅通过嗜酸性粒细胞的自发荧光来识别它们，而不需要任何标记。这说明未来可以根据自身的荧光来识别不同的细胞群。虽然额外的噪音令人痛苦，但其中有信息。我们只需要读出信号。